人腦神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞SK-N-AS說明書

一、產(chǎn)品概述

二、 貼壁細(xì)胞接收注意事項(xiàng)

貼壁細(xì)胞經(jīng)過快遞運(yùn)輸顛簸會(huì)出現(xiàn)漂浮脫落等情況： 收到先放培養(yǎng)箱靜置穩(wěn)定。如有脫落需收集處理，處理細(xì)節(jié)請(qǐng)查閱以下信息，原瓶內(nèi)為運(yùn)輸培養(yǎng)液，血清含量只有5%，需及時(shí)更換專用wan全培養(yǎng)基。 收到細(xì)胞后請(qǐng)把細(xì)胞圖片狀態(tài)發(fā)此群里面， 根據(jù)圖片可以給出接下來的處理建議（傳代或者換液），一次建議一比二傳代至2個(gè)T25。 貼壁細(xì)胞傳代步驟： 準(zhǔn)備工作：胰酶和wan全培養(yǎng)基（需要提前37度復(fù)溫）、PBS（常溫）避免細(xì)胞遇冷受刺激

（1） 吸出原培養(yǎng)液

（2） 加入2ml左右PBS，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞，吸出PBS丟棄

（3） 加入1ml左右0.25%含EDTA的胰酶，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤所有細(xì)胞。

（4） 根據(jù)不同的細(xì)胞放入培養(yǎng)箱時(shí)及時(shí)關(guān)注消化時(shí)間，消化約2-3min，顯微鏡下看到細(xì)胞中間的細(xì)胞明顯分離變圓細(xì)胞間隙變大，顯微鏡下看細(xì)胞呈單個(gè)游離狀態(tài)，側(cè)立培養(yǎng)瓶細(xì)胞可以滑落時(shí)可終止消化，可以輕拍培養(yǎng)瓶側(cè)身。（消化時(shí)主要看消化狀態(tài)，如果沒有變圓，側(cè)立時(shí)不能滑落時(shí)，可以適當(dāng)延長消化時(shí)間，每30s觀察一次細(xì)胞）

（5） 加入3ml含10%血清的培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)輕輕吹打（不要太用力）使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。

（6） 收集細(xì)胞懸液離心，1000rpm/min（約250g） 5分鐘，離心完吸出上清丟棄。

（7） 加入新鮮wan全培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細(xì)胞即可，按需接種到新培養(yǎng)瓶，補(bǔ)wan全培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。

（8） 檢查培養(yǎng)箱二氧化碳，溫度和水盤。

這個(gè)是貼壁細(xì)胞傳代的方法，特別注意的是第4步消化過程，消化至到細(xì)胞wan全變圓以后側(cè)立培養(yǎng)瓶細(xì)胞可以出現(xiàn)滑落時(shí)再終止消化。

消化成游離狀態(tài)，后續(xù)輕輕稍微吹一下即可很好的分散細(xì)胞

后續(xù)處理建議：傳代后2-3天換液一次即可，（如細(xì)胞第二天全部貼壁培養(yǎng)基顏色變黃，可以換液，）無需每天換液（換液太勤可能會(huì)損失細(xì)胞影響細(xì)胞狀態(tài)）換液時(shí)候如果沒有特殊情況也可以不用PBS清洗

三、相關(guān)產(chǎn)品

WS101 人白血病阿霉素耐藥株 K562/ADR

WS-h382 人卵巢癌腺癌阿霉素耐藥株 OVCAR-8/ADR

WS-h073 人結(jié)直腸癌氟尿嘧啶耐藥株 HCT-15+5FU

WS104 人類星形膠質(zhì)瘤耐替莫唑胺細(xì)胞 U251MG/TMZ

WS-h253 人乳腺癌阿霉素耐藥細(xì)胞株 MCF-7+adr

WS106 人舌鱗癌順鉑耐藥株 CAL 27+DDP

WS107 人口腔鱗癌順鉑耐藥株 SCC25+DDP

WS108 人胃癌順鉑耐藥株 AGS/DDP

WS-h005 人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞吉西他濱耐藥株 ASPC-1/GEM

WS-SK003 人卵巢癌順鉑耐藥株 SKOV3/DDP

WS-0140a 人肺腺癌耐順鉑株 A549/DDP

WS112 人大細(xì)胞肺癌順鉑耐藥株 NCI-H460/cis

WS-0057a 人結(jié)直腸癌細(xì)胞氟尿嘧啶耐藥株 LOVO+5FU

WS114 胃癌順鉑耐藥株 SGC7901/DDP

WS-0146a 吉非替尼耐藥PC-9GR PC-9GR

WS116 肺癌紫杉醇耐藥株A549+Taxol　 A549+Taxol　

WS549A 人肺癌阿霉素耐藥株 A549/Adr

WS118 人肝癌阿霉素耐藥株 BEL7402/Adr

WS119 人膀胱癌阿霉素耐藥株 BIU-87/Adr

WS120 人結(jié)腸癌阿霉素耐藥株 HCT8/Adr

WS121 人胃癌阿霉素耐藥株 SGC7901/Adr

WS122 人結(jié)腸癌阿霉素耐藥株 hct116/Adr

WS123 人肝癌阿霉素耐藥株 SMMC-7721/Adr

WS124 人宮頸癌阿霉素耐藥株 Hela/adr

WS125 人胃癌阿霉素耐藥株 BGC823/adr

WS126 人卵巢癌阿霉素耐藥株 HO-8910/Adr

WS127 人乳腺癌順鉑耐藥株 MDA-MB-231/adr

WS128 人結(jié)腸癌紫杉醇耐藥株 HCT8/Taxol

WS129 人白血病紫杉醇耐藥株 K562/Taxol

WS130 人肝癌紫杉醇耐藥株 BEL7402/Taxol

WS131 人胃癌紫杉醇耐藥株 BGC823/Taxol

WS132 人宮頸癌紫杉醇耐藥株 Hela/Taxol

WS-h081 人結(jié)直腸腺癌紫杉醇耐藥株 HCT15/Taxol

WS134 人乳腺癌紫杉醇耐藥株 MDA-MB-231/Taxol

WS135 人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株 HCT8/L

WS116L 人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株 hct116/L

WS137 人肝癌耐奧沙利鉑細(xì)胞株 SMMC-7721/L

WS138 人胃癌奧沙利鉑耐藥株 HGC27/L

WS139 人肝癌氟尿嘧啶耐藥株 BEL7402/FU

WS008F 人結(jié)腸癌氟尿嘧啶耐藥株 HCT8/FU

WS7901F 人胃癌氟尿嘧啶耐藥株 SGC7901/FU

WS142 人結(jié)腸癌氟尿嘧啶耐藥株 SW620/5-Fu

WS143 人胃癌氟尿嘧啶耐藥株 BGC823/FU

WS144 人宮頸癌氟尿嘧啶耐藥株 Hela/FU

WS145 人肝癌順鉑耐藥株 BEL7402/DDP

WS146 人膀胱癌順鉑耐藥株 BIU-87/DDP

WS147 人結(jié)腸癌順鉑耐藥株 HCT8/DDP

WS148 人乳腺癌順鉑耐藥株 MCF7/DDP

WS149 人胃癌順鉑耐藥株 SGC7901/DDP

WS150 小鼠白血病順鉑耐藥株 L1210/DDP

WS151 人白血病順鉑耐藥株 K562/DDP

WS152 人肝癌順鉑耐藥株 Huh-7/DDP

WS153 人肝癌順鉑耐藥株 SMMC-7721/DDP

WS154 人卵巢癌順鉑耐藥株 HO-8910/DDP

WS155 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞順鉑耐藥株 HCT15/DDP

WS156 人卵巢癌順鉑耐藥株 A2780/DDP

WS157 人胃腺癌耐藥株 AGS/DDP

WS158 人卵巢癌耐藥株 SK-OV-3/DDP

WS159 人乳腺癌順鉑耐藥株 MDA-MB-231/DDP

WS160 人結(jié)腸癌長春新堿耐藥株 HCT8V

WS161 人肺癌吉非替尼耐藥株 A549/吉非替尼耐藥株

WS162 人肝癌索拉非尼耐藥株 HUH-7/Sorafenib

WS163 人神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤耐藥株 U343/TMZ

WS164 人肺癌吉西他濱耐藥株 A549/吉西他濱